Перегляд вихідного коду сторінки Визначення ТБК – активних продуктів у плазмі крові

Визначення ТБК - активних продуктів проводили за методикою Л.І. Андреєвої 4.
Рівень ТБК-активних продуктів визначали у плазмі крові. Робота по визначенню ТБК-активних продуктів проводилася за протоколом, що подано у таблиці 2.1. 

Таблиця 2.1. 
Протокол процедури визначення ТБК- активних продуктів
Реагенти	Контроль	Експериментальний зразок
плазма або 10 % гомогенат клітин, мл	–––	1,00
1ммоль/л FeSO4•7H2O, мл	0,10	0,10
1 % ортофосфорна кислота, мл	2,00	2,00
0,6 % тіобарбітурова кислота, мл	1,00	1,00
інкубація 60 хв. при 100°С з наступним охолодженням

Вміст ТБК-активних продуктів розраховуємо за формулою:
 
де СМ – концентрація ТБК-активних продуктів, у мкмоль/л;
Адосл – оптична щільність проби;
3 мл – об’єм водної фази;
0,1 мл – об’єм проби;
106 – коефіцієнт перерахунку з моль/л на мкмоль/л;
1,56∙105  – молярний коефіцієнт екстинкції.



2.5. Визначення ТБК – активних продуктів у еритроцитах крові

Метод заснований на утворенні забарвленого комплексу при взаємодій МДА з тібарбітуровою кислотою.
Реактиви:
1.	Розчин трихлороцтової кислоти (ТХО), 170г/л;
2.	Розчин 2 – тіобарбітурової кислоти (ТБК), 8 г/л
3.	Розчин хлориду натрію, ізотонічний, 0,15 моль/л (9г/л)
Хід визначення. Для дослідження відбирають 0,1 мл еритроцитів, тричі відмитих охолодженим ізотонічним розчином, і гемолізуються внесенням у пробірку 2,0мл дистильованої води. До отриманого гемолізаті додають 1,0 мл розчину ТБК. Пробу прогрівають у киплячій водяній лазні протягом 10 хв., потім центрифугують 10 хв. при 300 об/хв. Інтенсивність забарвлення вимірюють при довжині хвилі 540 нм у кюветі з товщиною шару 1 см.

                 Аоп*106*4
С(мкмоль/мл) =  ___________    , де                     
                1,56*105*0,1
Адосл – оптична щільність проби;
4 мл – об’єм водної фази;
0,1 мл – об’єм проби;
106 – коефіцієнт перерахунку з моль/л на мкмоль/л;
1,56∙105  – молярний коефіцієнт екстинкції.